品牌: frdbio
公司: 福因德科技(武漢)有限公司
貨號(hào): ARL0020 規(guī)格: 0.5/4.0/15ml
產(chǎn)品詳情請(qǐng)聯(lián)系金山科研平臺(tái)微信:jinshanbio 金山科研平臺(tái): 本生物素標(biāo)記試劑盒提供了生物素快速標(biāo)記所需全部試劑,用于含有伯氨基(NH2-)的蛋白/抗體/多肽或者其他大分子的標(biāo)記。生物素標(biāo)記試劑盒
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詳細(xì)信息
生物素快速標(biāo)記試劑盒Biotin Quick Labeling Kit
產(chǎn)品貨號(hào):ARL0020K有效期:2-8℃ 18個(gè)月
主要組分: 活性生物素 2mg/4mg/6mg 超 濾 管 1支 標(biāo)記緩沖液 30mL/60mL/90mL 標(biāo)記物保存液 2mL/4ml/10ml 助溶劑(DMSO) 1mL/1.5mL/2mL選購(gòu)之前客戶需要根據(jù)待標(biāo)記物的分子量大小和標(biāo)記量選擇最適宜的型號(hào)
產(chǎn)品編號(hào)最大標(biāo)記體積待標(biāo)記物最小分子量可標(biāo)記抗體量ARL0020K-3K-0.5mL0.5mL3kDa0.2-10mgARL0020K-3K-4.0mL4.0mL3kDa1.0-80mgARL0020K-3K-15mL15mL3kDa5-300mgARL0020K-10K-0.5mL0.5mL10kDa0.2-10mgARL0020K-10K-4.0mL4.0mL10kDa1.0-80mgARL0020K-10K-15mL15mL10kDa5-300mgARL0020K-30K-0.5mL0.5mL30kDa0.2-10mgARL0020K-30K-4.0mL4.0mL30kDa1.0-80mgARL0020K-30K-15mL15mL30kDa5-300mgARL0020K-50K-0.5mL0.5mL50kDa0.2-10mgARL0020K-50K-4.0mL4.0mL50kDa1.0-80mgARL0020K-50K-15mL15mL50kDa5-300mgARL0020K-100K-0.5mL0.5mL100kDa0.2-10mgARL0020K-100K-4.0mL4.0mL100kDa1.0-80mgARL0020K-100K-15mL15mL100kDa5-300mg
金山科研平臺(tái): 本生物素快速標(biāo)記試劑盒提供了生物素快速標(biāo)記所需全部試劑,用于含有伯氨基(NH2-)的蛋白/抗體/多肽或者其他大分子的標(biāo)記。其反應(yīng)原理如下:產(chǎn)品特點(diǎn):
使用方法簡(jiǎn)單,無(wú)需額外準(zhǔn)備試劑;節(jié)約時(shí)間,整個(gè)過(guò)程僅需 90min; 通過(guò)離心脫鹽和去除游離的生物素,無(wú)需透析或者凝膠過(guò)濾; 既可用于微量標(biāo)記又可大量標(biāo)記,每次可標(biāo)記 0.2-2mg;
生物素標(biāo)記使用量的計(jì)算: 每個(gè)反應(yīng)中生物素試劑的使用量取決于待標(biāo)記蛋白質(zhì)的量和濃度。例如,通過(guò)我們實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析表明,標(biāo)記2mg/ml 的抗體(IgG ,150KD),使用生物素和抗體的分子比為 20:1 能達(dá)到最佳效果;其他蛋白的標(biāo)記可以根據(jù)實(shí)際情況,參照此比例類推。 計(jì)算公式如下:
6其中:
V(μL)為生物素的體積;
V1(mL)為待標(biāo)記物(蛋白/抗體/其他含有伯胺-NH2的大分子);
C1(mg/mL)為待標(biāo)記物的濃度;
R 為生物素與待標(biāo)記物的分子比例; M為待標(biāo)記物的分子量(道爾頓,Dalton,Da) C(mM)為生物素的濃度計(jì)算示例:我們將生物素配置成10mM的濃度,用來(lái)標(biāo)記1mL的2mg/mL 的抗體(IgG ,150KD),準(zhǔn)備加入的生物素與抗體的比例為20:1,那么帶入公式計(jì)算
6=26.66uL實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備: 1.仔細(xì)閱讀使用說(shuō)明書(shū)。 2. 按照生物素標(biāo)記使用量的計(jì)算的公式計(jì)算所需要的生物素的量。 3.提前 20min 從冰箱中取出試劑盒,使試劑盒各組分平衡至室溫。4.溶解活性生物素:加入適量的生物素助溶劑至活性生物素瓶中,使活性生物素至合理的濃度,一般推薦的濃度為10mM(本試劑盒中的生物素分子量454.54,每毫克加入220ul助溶劑即為10mM)特別提示:
溶解的活性生物素最好一次性使用完,如果使用不完可以密封放在-20℃的冰箱內(nèi),一月內(nèi)可以使用,但是標(biāo)記效率會(huì)降低;生物素助溶劑使用完之后需要立即密封保存,防止吸潮。
操作步驟:(本操作步驟按照 1mg抗體的量進(jìn)行標(biāo)記)
取1mg 待標(biāo)記抗體于超濾管中,并加入相應(yīng)體積的標(biāo)記緩沖液,使抗體的終濃度為 2mg/mL,12,000 x g 離心 10min。
請(qǐng)注意:A.超濾管的最大體積和最大截留分子量,本實(shí)例超濾管的最大體積為 0.5mL;B.如果待標(biāo)記抗體濃度低時(shí),可先超濾離心濃縮;C.如果待標(biāo)記物含有游離的氨基(Tris,氨基酸或者其他干擾物,需要用標(biāo)記緩沖液反復(fù)超濾確保其去除干凈)2. 加入13.3μL生物素溶液和適量標(biāo)記緩沖液至上述超濾管中,使終體積為 0.5ml,并輕輕吹打混勻。放入 37℃恒溫箱中避光溫育 30min。 3. 12,000 x g 離心 10min。 4. 加入適量標(biāo)記緩沖液至上述超濾管中,并輕輕吹打混勻,12,000 x g 離心 10min, 重復(fù)此步驟多次。5. 收集超濾管中的溶液(即生物素標(biāo)記的抗體),加入等體積保存液,-20℃保存。注意事項(xiàng): 1. 本試劑盒也可標(biāo)記其它含有氨基(NH2-)的抗原、HRP、多肽,具體標(biāo)記比例根據(jù)待標(biāo)記物中氨基的數(shù)量確定。 2. 本試劑盒中的生物素助溶劑為DMSO ,使用完畢后要密封干燥保存。 3. 操作步驟5中,可用也可用標(biāo)記緩沖液為回收標(biāo)記抗體的緩沖液,也可使用其它任何緩沖液或保護(hù)劑。 4. 本試劑盒未開(kāi)封前的有效期為18個(gè)月,請(qǐng)?jiān)谟行趦?nèi)使用;本試劑盒中的生物素加入助溶劑之后,如果使用不完,請(qǐng)密封放在-20℃保存,一周內(nèi)可以正常使用,如果超過(guò)一周,一個(gè)月之內(nèi)使用,使用里量請(qǐng)酌情加大;超過(guò)一個(gè)月請(qǐng)不要再使用。5. 請(qǐng)注意試劑盒中提供的超濾管的規(guī)格和分子截流大小來(lái)確定是否適合您的最佳標(biāo)記條件; 6. 在步驟 2 中,標(biāo)記其它抗體時(shí),我們最好控制抗體的終濃度為 2mg/mL,然后再根據(jù)抗體的量計(jì)算應(yīng)加入活性生物素的體積。*本試劑僅供實(shí)驗(yàn)室研究使用
溫馨提示:不可用于臨床治療。
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