多聚-L-賴氨酸(15-30萬)-切片與免疫組化-蛋白與免疫
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多聚-L-賴氨酸(15-30萬)| 有效期 | 2年 |
|---|---|
| 溶解性 | 10 mg/mL in water |
| 別名 | 聚-L-賴氨酸 氫溴酸鹽 多聚賴氨酸 |
| 英文名稱 | Poly-L-Lysine |
| CAS | 25988-63-0 |
| 分子量 | 150,000-300,000 |
| 儲存條件 | -20℃ |
| 單位 | 支 |
Poly-L-lysine聚合物可用于促進(jìn)細(xì)胞粘附到固體基質(zhì),用于科研實(shí)驗(yàn)。
原理： 多聚賴氨酸溶液是廣泛應(yīng)用的組織切片與玻片黏合劑，該多聚陽離子分子與組織切片上的陰離子相互作用會產(chǎn)生較強(qiáng)的黏合力。培養(yǎng)瓶表面的性質(zhì)對于細(xì)胞培養(yǎng)至關(guān)重要，細(xì)胞表面的糖蛋白（陰性）易于吸附在親水性的表面上，因而細(xì)胞培養(yǎng)表面如果有相當(dāng)含量的陽性電荷更能促進(jìn)細(xì)胞吸附，這正是運(yùn)用多聚賴氨酸優(yōu)化細(xì)胞培養(yǎng)表面的重要所在。 應(yīng)用： 適用組織學(xué)，免疫組織化學(xué)，冰凍切片，細(xì)胞涂片，原位雜交等使用的玻片的防脫片處理，以防實(shí)驗(yàn)操作過程中組織掉片。也可用于細(xì)胞培養(yǎng)，增加細(xì)胞貼壁能力。 溶液配制： 用去離子水溶解，配制成母液備用。保存于-20℃。 玻片處理： 1. 滅菌水稀釋聚賴氨酸溶液，一般的使用濃度為0.01％。 2. 將玻片浸在稀釋的多聚賴氨酸溶液5分鐘。注意增加時(shí)間不會提高包被效果。 3. 在60℃烘箱1小時(shí)干燥，或室溫18-26℃過夜干燥待用。 注意： 1. 每100mL已稀釋的多聚賴氨酸溶液要包被的玻片40-90張， 超過90張片子將影響其黏合力。 2. 用之前的玻片必須保持清潔。必要時(shí)用含1% HCl的70%乙醇溶液來清洗。 3. 釋過的多聚賴氨酸溶液要放在2-8℃，至少在3個(gè)月內(nèi)是穩(wěn)定的。 4. 用過的稀釋液要過濾，若出現(xiàn)渾濁或長菌要丟棄 5. 多聚賴氨酸濃度可以高一些，吸出來的可以重復(fù)利用至少20次。 培養(yǎng)瓶處理： 1. 包被培養(yǎng)板或者是培養(yǎng)瓶，一般多聚賴氨酸濃度為0.01％， 2. 準(zhǔn)備100ml三蒸水，經(jīng)高壓滅菌處理。 3. 0.01%的多聚賴氨酸以50微升每平方厘米的量均勻涂于培養(yǎng)底物的表面，室溫下靜置5min，吸除多余液體。 4. 加入滅菌水，反復(fù)沖洗三次，無菌操作。 5. 處理后無菌晾干備用。 6. 回收后保持無菌的多聚賴氨酸可反復(fù)利用。
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